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猪瘟灭活疫苗抗体消长规律动态研究
  

本试验采用IHA 试验方法, 对经猪瘟灭活疫苗免疫的猪抗体产生的水平进行了监测, 并对仔猪母源抗体的消长规律进行了研究。结果表明仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平呈正相关, 其首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关, 但其抗体水平与免疫次数呈正相关。主要免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关, 而与首免日龄无关。攻毒结果表明:当IHA <6 log2 时, 仅能抗死亡;当IHA ≥7 log2 时, 可抗感染。

猪瘟(Classical Swine Fever ,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus , CSFV)引起的一种猪的急性、烈性传染病, 被国际兽疫局(OIE)列为A 类传染病。我国每年都投入大量的人力、物力、财力进行猪瘟疫病的研究及控制工作。但近年来猪瘟仍是发生, 且有增强的趋势。至今尚无特效的治疗药物, 疫苗预防仍是我国防治猪瘟的主要手段。本文通过对母源抗体跟踪监测和对猪瘟灭活疫苗不同免疫剂量和不同首免日龄进行比较试验, 系统地反映了猪瘟母源抗体及灭活疫苗免疫后抗体的消长规律和免疫效果。为进一步掌握猪瘟灭活疫苗的免疫效力及免疫期、为该病的防治制定合理的免疫程序及为猪瘟的扑灭和净化提供科学为依据。

1、材料和方法

1.1 试 剂 

猪瘟阳性血清, 批号20030506 ;猪瘟阴性血清, 批号:20030612 ;猪瘟正向间接血凝诊断液, 批号20030315 、20030618 购于中国农科院兰州兽医研究所。

1.2 疫 苗 

猪瘟灭活疫苗, 批号:030204 , 青岛易邦生物工程有限公司提供。

1.3 试验用猪 

种母猪、仔猪, 由青岛易邦生物工程有限公司上马种猪场提供。

1.4 攻击用强毒 

采用猪瘟强毒石门系(Shimen),由中国兽医药监察所提供。

1.5 抗体测定 

猪瘟正向间接血凝试验(IHA)按常规方法进行。

1.6 母猪抗体水平检测 

对不同批次常规免疫的初产母猪和不同胎次的经产母猪分别于产前1~2 d 采血, 用正向间接血凝试验(IHA)测定其抗体水平。

1.7 仔猪母源抗体消长规律 

根据抗体水平高低将母猪分为高(Ⅰ)、中(Ⅱ)、低(Ⅲ)三组, 每组10 头, 分别对其所产仔猪(每组80 头)每隔一周采血1 次, 用IHA 方法测定其母源抗体水平变化。

1.8 猪瘟灭活疫苗不同免疫剂量和不同首免日龄的效果比较 

根据7 日龄对母源抗体的高低,将上述仔猪分为A 、B 、C 三群, 每群60 头, 每隔一周采血, 用IHA 方法测定其母源抗体变化;至28日龄时, 从A 、B 、C 三群仔猪中各随机取出20 头进行首免, 其中10 头每头接种猪瘟灭活疫苗2mL(1 头份)、另10 头每头接种猪瘟灭活疫苗4mL(2头份);至35 日龄时, 再随机取未免疫仔猪20 头进行首免;剩余仔猪于49 日龄进行首免, 免疫方法与免疫剂量同第一组;各组于接种后同条件下分栏饲养, 分别于首免后28 d 和56 d 进行两次加强免疫, 免疫方法与免疫剂量同首次免疫;每次免疫后28 d 采血, 用IHA 方法测定其抗体变化。

1.9 免疫后不同的时间攻毒保护 

分别取IHA抗体效价为4 log2 、7 log2 、8 log2(±0 .2)的仔猪, 攻击猪瘟强毒石门系, 每头1mL, 记录结果。

2、结 果

2.1 初产和不同胎次经产母猪抗体水平比较 

表1 可见, 初产母猪抗体水平普遍较低, 离散度高, 个体间差异大;与经产母猪相比, 每胎相差一个多滴度, 经t 检验, 差异极显著(P <0 .01)。经产母猪随胎次的增加和每年2 次以上的猪瘟疫苗免疫注射, 其抗体水平也相应增加。四胎以后抗体水平高且稳定, 离散度小, 个体间差异不大, 抗体水平均保持在9 .5 log2 左右。

微信截图_20171107145041.png

2.2 仔猪母源抗体消长规律

 表2 说明, 无论母猪抗体水平高低, 所产仔猪的初乳前抗体水平均为0 , 仔猪采食初食后, 仔猪的母源抗体水平迅速提高, 且与母猪抗体水平呈正相关, 7 日龄时达到高峰, 其抗体与母猪抗体水平相当, 随后仔猪的母源抗体水平迅速下降, 抗体效价越高其下降越快,抗体效价低的其下降相对较慢, 至28 日龄, 3 组之间差异较小, 至49 日龄时, Ⅱ 、Ⅲ相同Ⅰ 组经t检验, 仍然差异极显著(P <0 .01)。

微信截图_20171107145115.png

2.3 猪瘟灭活疫苗不同免疫剂量和不同首免日龄的效果比较 

表3 结果表明, 仔猪的主动免疫抗体效价不受母源抗体的影响, 首次免疫后, 抗体效价均有所提高, 母源抗体高的增长幅度小, 母源抗体低的增长幅度大, 在首免后28 d , 接种2mL 的免疫组的抗体效价在5 .6 左右, 接种4 mL 的免疫组的抗体效价均在6 .8 左右;同一免疫剂量的仔猪抗体效价经方差检验, 无差异;两个免疫剂量组比较结果表明, 免疫剂量为4mL 的免疫组较2 mL的免疫组的抗体效高一倍(0 .5 log2), 两组的免疫抗体效价经方差检验, 差异显著;主动免疫抗体效价与首免日龄无关, 分别于28 、35 、49 日龄时首免,以后每隔28 d 加强免疫一次, 同一免疫剂量、不同首免日龄的各组抗体效价, 经方差检验, 差异均不显著;主要免疫抗体效价与免疫次数正相关, 每增加一次免疫, 可使抗体水平增加一个滴度。

2.4 抗体效价与攻毒保护的平行关系 

攻毒结果表明, IHA 抗体效价为4 log2 , 攻毒保护数为6/10 , 病毒分离阳性率为10/10 ;IHA 抗体效价为5log2 攻毒保护数为10/10 , 但病毒分离阳性率为5/10 ;IHA 抗体效价为6 log2 以上时, 攻毒保护10/10 , 病毒分离阳性率为1/10 ;IHA 抗体效价为7 log2以上时, 攻毒保护10/10 , 病毒分离阴性。由表4结果表明抗体效价为6 log2 以下时, 仅能抗死亡不能抗感染, 当抗体效价大于7 log2 时, 能抗感染, 攻毒获全保护。

3、讨 论

3.1 本次试验的结果表明, 母猪猪瘟抗体水平随繁殖胎次的增加和免疫次数的增多而提高, 由此可见, 母猪猪瘟抗体水平随猪瘟疫苗免疫次数的增加而提高。

3.2 仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平成正相关,提高母猪抗体水平是提高仔猪母源抗体水平的关键。研究表明母源抗体不是通过胎盘传给子代, 而是通过初乳传给子代。因此, 要使仔猪获得较高的母源抗体, 必须使仔猪充分采食初乳。

3.3 猪瘟灭活疫苗不同接种剂量比较试验表明,主要免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关, 随免疫剂量的增加抗体水平相应增加, 且差异十分显著, 这可能与疫苗的剂型有关, 适当增加灭活疫苗的抗原量可有效的提高抗体水平, 但不可超量, 过大剂量的免疫可造成免疫麻痹或免疫耐受, 从而影响免疫效果。

3.4 仔猪的抗体水平与免疫次数呈正相关, 增加免疫次数可相应的提高抗体水平, 这除了增加免疫次数相应的增加了免疫剂量外, 更主要的是增加免疫次数可提高记忆免疫, 使抗体水平提高的更快、更高。所以不能用一次高剂量免疫来代替多次免疫。

3 .5 首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关, 母源抗体越高, 首免后的主动免疫抗体增长幅度越小, 反之越大。然而, 无论母源抗体高低, 首免后的抗体水平基本一致, 免疫抗体效价的高低不受母源抗体的影响。

3.6 主动免疫抗体效价与首免日龄无关, 同一免疫剂量、不同首免日龄的各组抗体效价, 经方差检验, 差异均不显著。因此, 为防止猪瘟野毒的早期感染, 各场应结合实际情况, 可将首免日龄适当提高, 使仔猪早日获得主动免疫。

专家介绍
李明义 

作者介绍:信得科技集团副总裁,研究院院长,河南农业大学学士和硕士学位,中国农业大学农学博士学位,中国动物卫生与流行病学中心生物技术研究室主任,国家诊断液制备中心专家,兼任河南农业大学、青岛农业大学教授(博士生导师)。

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